Ako Monitor mobilné rast

Vedci pravidelne sledovať rast buniek . To môže byť súčasťou pravidelnej údržby bunky , alebo ako súčasť experimentu . Napríklad , experiment by mohol byť nastavený tak , aby porovnať vplyv troch rôznych liekov na rast buniek . V tomto prípade , štyri banky buniek na rovnakej koncentrácii sú nastavené , jeden bez liekov ako ovládací prvok , a jeden pre každú z troch liekov . Bunky sú odstránené z baniek v pravidelných intervaloch , napríklad každý deň , spočíta a zaznamená . Čísla buniek sú vynesené do grafu proti času , vplyv liekov na rast buniek môže byť v porovnaní s kontrolou . Veci , ktoré budete potrebovať
bunky v suspenzii
Skúmavky
pipety
Rastové médium
hemacytometru
krycím sklíčkom klipart Hand Tally Counter
papiera objektívu
trypánovej modrej
Mikroskop
Zobraziť ďalšie inštrukcie
článkov
1

Vírivé buniek jemne získať aj zastavenie . Odobratie objem buniek , ako je napríklad 1,0 ml ( ml ) , s pipetou a prevedie do skúmavky . Zriedi buniek , čím sa získa 100000 až 500000 buniek na ml - to by malo poskytovať približne 100 buniek potrebných pre štatistickú významnosť pri počítaní
2

zriedi bunky , ak je to potrebné , pridaním 9,0 ml média na . 1,0 ml buniek . Mix a nahrávať riedenie . Ak sú bunky stále ešte príliš zahustí , odstránenie 1,0 ml zriedených buniek do novej skúmavky , pridá sa 9,0 ml média , premieša sa a zaznamená riedenie . Bunky cicavcov zvyčajne rastú v rozmedzí od 100000 do 5000000 na ml , takže 0-2 riedenie by mala byť dostatočná .
3

Zmiešajte bunky z konečného riedenia. Odstráňte malý objem , ako je napríklad 0,1 ml , a miesto do novej skúmavky . Pridá sa rovnaký objem trypánovej modrej , premiešajte a zaznamenajte riedenie . Mŕtve bunky zaberajú trypánovej modrej a objaví sa modro pod mikroskopom .
Počítanie
4

vyleštite hemacytometru a krycie sklíčko s objektívom papiera , a miesto krycie sklíčko na hemocytameter siete . Pridajte kvapku zriedených buniek V - tvaru vedľa siete . Bunky pohybovať pod krycím vzlínaním .
5

Umiestnite snímku o mikroskop , zamerať sa na štartovom rošte a používať ručné Tally Counter počítať životaschopné , a to modré , bunky . Bunky by sa nemali prekrývať , ak príliš hustá , vykonajte ďalšie riedenie . Ak bunky sú príliš zriedený , pripraviť viac koncentrovaný vzorka .
6

Odstráňte hemacytometru , čistý , znovu a znovu počítať . Počet každý bunkový vzorku trikrát .
Výpočet
7

Spočítajte počet buniek na ml . Hemacytometru mriežka je rozdelená na 9 veľkých štvorcov , každý o objeme 0,1 ml .
8

Rozdeľte počet buniek počítaných podľa počtu veľkých štvorcov používaných ( deväť ak budete používať celú mriežku ) , a vynásobte 10,000 získať buniek na ml . Vynásobte riediaci faktor ( y ) na konečnú koncentráciu .
9

Zaznamenajte dátum , vzorka , buniek , faktory riedenia a konečný počet buniek na ml . Pripravte graf počtu buniek v závislosti na čase ukázať , rast buniek .

• Predchádzajúca strana: Ako vytvoriť nový Keychain 
• Ďalšia strana: Ako vytvoriť Apple Mail šablóny