Protokol pre NIH 3T3

NIH3T3 bunky sú široko používané vo výskumných laboratóriách na virológiu , bunkovej a molekulárnej biológie experimentov . Myšou embryonálny fibroblasty bunková línia bola vyvinutá George Todaro a Howard Green v roku 1962 na New York University . Stredná

NIH3T3 bunky rastú pripojená k plastovej riadu na 37 stupňoch Celzia inkubátora ( 99 stupňov Fahrenheita ) . Ich rast je stredne Dulbeccova Modified Eagle Medium , doplnenom 10 % teľacím sérom - nie 10 % fetálneho séra hovädzieho dobytka , že ostatné bunkové línie dávajú prednosť
Šírenie

Rozdeľte NIH . 3T3 každé 2 až 3 dni - to je dôležité , že nesmie byť dovolené , aby sa stala príliš hustá . Vyberte stráveného kultivačné médium a umyť misku s fosfátovým pufrom fyziologickým roztokom . Bunky sa inkubujú v trypsínu oddeliť bunky a sledovať oddelenie s mikroskopom . Ak sú bunky zaoblené a oddelené , jemne miešajte je s pipetou . Pridať kompletné rastové médium pre zastavenie enzymatické reakcie . Re- dosky bunky na 300000 buniek na 10 cm ( 3,9 palca ) jedlo .
Používa

NIH3T3 sú použijú na pestovanie vírusu leukémie myší alebo funkciu ako imobilizované bunky , alebo vrstvy podávač , ktoré dodávajú potrebné rastové faktory pre bunky , ako sú kmeňové bunky a keratinocyty . Boli pestované na pavúčie hodváb v experimentoch , ktorých cieľom je zistiť , biomateriálov s potenciálom pre regeneráciu tkanív .

• Predchádzajúca strana: Ako nainštalovať opravy pamäťovej karty na X86 Leopard 
• Ďalšia strana: Čo robiť , keď MacBook hovorí nenabíja