Laczó Protocol

Lacza je bakteriálny gén , ktorý produkuje enzým beta - galaktozidázu , ktorý štiepi laktózu na glukózu a galaktózu . Enzým tiež štiepi zlúčenina X - gal , ktorý produkuje modrú farbu , ktorá molekulárnej biológovia použiť ako marker alebo reportér sledovať prítomnosť génu Lacza v bunkách . Transfekcia

Vedci odkaz na gén Laczó s génom , ako je inzulín , s fragmentom DNA tzv plazmid . Oni používajú chemické alebo elektrické metódy transfekcia dostať plazmid do buniek . Bunky sú testované na expresiu Laczó beta - galaktozidázy , ktorá bude tiež označovať prítomnosť inzulínu génu .
Fixácia

Po transfekciu boli bunky pestované na plastové Petriho misky . Pre test sa rastové médium sa odstráni a bunky sa premyjú fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátmi ( PBS ) . Čerstvé fixácia Roztok formaldehydu , metanolu a glutaraldehydu sa používa na upevnenie buniek po dobu dvoch minút . Fixačné sa odstráni a bunky sa premyjú raz PBS .
X - gal

čerstvé Farbiace roztok, ktorý obsahuje Ferri - X - gal , draselný kyanid draselný a ferro - kyanid je pridaný do buniek cez noc . Bunky sa premyjú raz PBS , a ak je prítomný gén Lacza , bude beta - galaktozidázu sa štiepi na X - gal a bunky budú modré .

• Predchádzajúca strana: Ako si vyrobiť G4 Panther bežať rýchlejšie 
• Ďalšia strana: Ako to rozoberať Liquid chladený Power Mac G5