Ako čistiť a regenerovať kolóne C8 HPLC

Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia ( HPLC ) je bežná metóda laboratórne analýzy , v ktorej je vzorka rozdelí na chemické zložky , ako je prechádza kolónou . Kolóna sa naplní poréznym obale zvyčajne založené na ošetrenom silikagélu . Štandardné reverznej fáze stĺpec , napríklad C8 , môže niekedy upchaté alebo znečistené . Tieto stĺpce možno často regenerovať pomocou niekoľkých jednoduchých techník . Veci , ktoré budete potrebovať klipart HPLC prístroj
vody
Metanol klipart acetonitrilu klipart izopropanolu klipart Methylenchloridová
hexánu
Zobraziť ďalšie inštrukcie
regeneračné stĺpec foto 1

Odpojte faulovanému stĺpca a zmeniť svoj postoj , takže mobilná fáza je teraz vstupuje do toho , čo je bežne výjazde z kolóny . Pripojte linku Vstup na druhom konci stĺpca ( koniec , ktorý bol pôvodne vstupné ) a spustiť to do odpadovej nádoby .
2

čerpadla cez sériu rozpúšťadiel v poradí podľa klesajúcej polarity . Základná rada je odporúčané začať s metanolom , potom postupujú cez acetonitril , acetonitril /izopropanol ( 75:25 ) , izopropanolu , metylénchloridu a hexánu . Je-li mobilnej fázy pôvodne sedí v stĺpci bol pufer , umývanie s vodou by malo predchádzať metanol . Prietok 1-2 ml za minútu , je zvyčajne vhodné , a asi 10 objemami kolóny každého rozpúšťadla by mala byť čerpaná . Objem kolóny je vnútorný priestor nie je zdvihnutá balenia a je vypočítaná ako ( 0,7 x pi x ( ID /2 ) ^ 2 x L ) , kde je číslo vnútorný priemer stĺpca a L je jeho dĺžka .

Sims 3

čerpadlá ďalších 10 objemov kolóny izopropanolu kolónou , aby bola pripravená na použitie s pôvodnou mobilnej fázy . Ak bol vyrovnávacej pamäti pôvodnej mobilnej fázy , tiež čerpať vodu cez kolónu po izopropanolu , než sa vráti k pôvodnému pufrovanom mobilnej fázy .
4

Odpojte stĺpec a obrátiť ju a znovu pripojiť tak , že je v jeho normálne konfiguráciu ( to znamená , že sa mobilná fáza bola čerpaná do vstupu kolóny ) . Pripojte výstup z kolóny do detektora .

• Predchádzajúca strana: Ako to urobiť Podmienené formátovanie Ak Ďalšie bunka prázdna 
• Ďalšia strana: Ako vypočítať číslo Frequency